چرا HEPES مهم است؟

• سلول‌ها بسیار حساس به تغییرات pH هستند. فعالیت آنزیمی و عملکرد سلولی به شدت به pH محیط وابسته است. فعالیت‌های متابولیکی سلول‌ها، به ویژه تولید دی اکسید کربن، می‌تواند منجر به تغییرات pH در محیط کشت شود. استفاده از HEPES به عنوان بافر، این تغییرات را به حداقل می‌رساند و ثبات pH را برای مدت طولانی حفظ می‌کند.

 نحوه عملکرد HEPES:

• HEPES یک بافر ضعیف است. این به این معنی است که می‌تواند یون‌های هیدروژن (H+) را به محیط اضافه یا کم کند تا pH ثابت بماند. این عمل با جذب یا رهاسازی پروتون‌ها در محلول انجام می‌شود.

 مزایای استفاده از HEPES:

• ثبات pH: حفظ pH پایدار در طول مدت کشت سلولی، که بسیار مهم برای عملکرد صحیح سلول‌ها است.

• کاهش تغییرات ناگهانی pH: به ویژه در محیط کشت با فعالیت متابولیکی بالا، این ویژگی از استرس ناشی از تغییرات ناگهانی pH جلوگیری می‌کند.

• افزایش عمر محیط کشت: با حفظ pH پایدار، عمر مفید محیط کشت افزایش می‌یابد و نیاز به تعویض مکرر محیط کشت را کاهش می‌دهد.

• بهبود عملکرد سلولی: ثبات pH به عملکرد متابولیکی و تقسیم سلولی کمک می‌کند.

ملاحظات مهم: 

• غلظت HEPES: غلظت مناسب HEPES برای کشت سلولی به نوع سلول و شرایط کشت بستگی دارد.

• سازگاری با سایر مواد: HEPES می‌تواند با برخی از مواد دیگر در محیط کشت واکنش دهد. بنابراین، باید به سازگاری آن با سایر افزودنی‌ها توجه شود.

• تأثیر بر رشد سلولی: در برخی از موارد، غلظت‌های بالا HEPES می‌تواند بر رشد سلولی اثر بگذارد. بهتر است از غلظت بهینه استفاده شود.