تریپسین در معده توسط آنزیمی به نام پیپسین تجزیه می‌شود. سپس به صورت غیرفعال به نام تریپسینوژن (Trypsinogen) توسط سلول‌های اپیتلیال پانکراس تولید می‌شود. تریپسینوژن در کیسه صفرا به وجود آمده و با تماس با آنزیمی به نام انتروکیناز به تریپسین فعال تبدیل می‌شود.

تریپسین به عنوان یک آنزیم مهم در آزمایشگاه‌های بیوشیمی و بیولوژیکال استفاده می‌شود. از آن برای تجزیه و تحلیل پروتئین‌ها، در سنتز پپتیدها و در تحقیقات مربوط به بیوشیمی و بیولوژی استفاده می‌شود.